與傳統雜交瘤技術開發平臺相比,Bioss搭建的單B細胞的單克隆抗體發現平臺主要是依托于Bioss多年的抗體開發以及豐富的抗體標記經驗,利用細胞分選技術從免疫的動物中分離外周血單核細胞 (PBMCs) 從而獲得抗原特異性的單個B細胞,利用分子生物學技術從抗原特異性的B細胞中獲得抗體序列信息,經體外重組表達、篩選,獲得滿足不同應用需求的基因工程重組兔單克隆抗體。
單克隆抗體與多克隆抗體比較,在特異性和性能穩定性上優勢明顯;由于兔子具有獨特的免疫系統,相比其他物種來源的抗體而言,兔源重組單克隆抗體有以下一些優勢:
①較高的親和力、較高的檢測靈敏度、較高的特異性和較高的穩定性;
②抗體的多樣化可識別更多的表位及稀有抗原,如磷酸化抗原、碳水化合物等;特別是對于一些難開發的翻譯后修飾位點特異性抗體、小分子化合物抗體、核苷酸 (DNA/RNA) 抗體、多糖類抗體具有很大優勢;
③抗體結構簡單,兔IgG僅有一種亞型,更易于人源化改造;
④重組技術可提高抗體生產的批次間一致性;
⑤可做到無動物源成分,滿足如抗體藥物等的生產需求。
?抗原免疫:Bioss運用二十多年的抗體開發經驗,采用自主的抗原設計思路與經驗,可選擇高質量原核蛋白、真核活性蛋白、非修飾性多肽、修飾性多肽、小分子化合物等作為免疫原,可開發用于WB、IHC、FCM等多種應用的抗體。?細胞分選:利用Bioss優秀的標記技術以及獨特的單B細胞的分選策略,在Thermo Fisher Scientific 最新型的Bigfoot流式分選儀的支持下,可以有效分選、富集特異識別抗原的B細胞,提升其在體外培養的成活率,保留兔B細胞的多樣性,大大的提升了篩選效率。為開發滿足不同應用的抗體提供了更多的可能性。
?抗體驗證:將分選的單個B細胞先在體外進行5~20塊96孔板單B細胞培養,然后將細胞培養的上清進行實驗驗證篩選。敲除驗證(Knockout Validation, KO驗證)是驗證抗體的所有方法中可接受性和可信度比較高的。同時結合Elisa、WB、FACS等功能學驗證。
?陽性克隆測序與表達:挑選驗證數據優異的陽性細胞克隆進行RT-PCR,來擴增其抗體可變區基因,然后進行測序。最后進行抗體的表達載體構建、抗體的表達。得到重組兔單抗。
Rrmab®重組兔單抗:把兔源抗體優勢轉化成穩定可復現的產品
Rrmab®系列目前已上線3000+重組兔單抗產品,包含2000+全球熱門靶點,全面覆蓋神經科學、腫瘤、細胞生物學、免疫與炎癥等重點研究方向;同時提供各類熒光標記、標簽與內參抗體、二抗及配套試劑。