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做過(guò)mIHC實(shí)驗(yàn)的人都懂,最耗時(shí)耗力的往往不是染色本身,而是"調(diào)體系":抗體種屬打架、信號(hào)弱到看不見(jiàn)、panel怎么排都不順,一版條件經(jīng)常要磨上幾個(gè)月。
如果你正在為這些問(wèn)題頭疼,這篇文章值得讀完——Bioss mIHC試劑盒全面升級(jí),圍繞"精準(zhǔn)、高效、便捷"三大重心,在抗體驗(yàn)證、熒光信號(hào)放大和兼容性上做了系統(tǒng)性改進(jìn);同時(shí),經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的常用多色Panel已經(jīng)就緒,TSA檢測(cè)技術(shù)服務(wù)也同步上線。從試劑盒到方案,再到代做服務(wù),一條鏈路全部配齊。
為什么大家都開(kāi)始做mIHC
多重免疫熒光(Multiplex immunohistochemical, mIHC)可以在一張切片上原位同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo),這是傳統(tǒng)單標(biāo)免疫組化難以實(shí)現(xiàn)的。它的價(jià)值在于,能直接評(píng)估復(fù)雜樣本中的細(xì)胞—細(xì)胞作用關(guān)系,分析樣本的異質(zhì)性,篩選生物標(biāo)志物組合——這些恰恰是理解細(xì)胞間相互作用、特別是腫瘤微環(huán)境的關(guān)鍵。同一張組織切片上,免疫細(xì)胞種類(lèi)、激活狀態(tài)、空間分布一次看清,數(shù)據(jù)維度遠(yuǎn)超多次單標(biāo)染色。
升級(jí)原理:TSA信號(hào)放大,把"微弱信號(hào)"放大100倍
這次升級(jí)的核心技術(shù)基礎(chǔ),是酪酰胺信號(hào)放大(TSA, Tyramide Signal Amplification)。原理可以拆成三步理解:
①一抗識(shí)別:高親和力抗體精準(zhǔn)結(jié)合靶標(biāo);
②級(jí)聯(lián)放大:多聚體HRP標(biāo)記的信號(hào)放大結(jié)構(gòu),實(shí)現(xiàn)信號(hào)倍增;
③熒光沉積:活化后的熒光底物與抗原上酪氨酸等殘基共價(jià)結(jié)合,形成穩(wěn)定熒光信號(hào)。
簡(jiǎn)單說(shuō),就是把"抗原—抗體"這個(gè)微小結(jié)合事件,通過(guò)酶學(xué)反應(yīng)在結(jié)合位點(diǎn)大量沉積熒光素,讓原本可能被淹沒(méi)的低豐度信號(hào)變得清晰可辨。更關(guān)鍵的是,每一輪體系里只有單一抗體孵育,通過(guò)熱修復(fù)或抗體洗脫液洗去前一輪抗體后再進(jìn)行下一輪染色——因此無(wú)需擔(dān)心抗體交叉反應(yīng)和一抗二抗的種屬匹配問(wèn)題,擺脫了傳統(tǒng)免疫熒光對(duì)抗體種屬來(lái)源的限制。
正是這套機(jī)制,讓升級(jí)后的試劑盒靈敏度較傳統(tǒng)IF提升100倍,逐輪標(biāo)記策略確保零交叉反應(yīng),定位精度可達(dá)亞細(xì)胞級(jí)。
三大優(yōu)勢(shì),定義mIHC新標(biāo)準(zhǔn)
精準(zhǔn):增強(qiáng)型熒光信號(hào)放大技術(shù),精準(zhǔn)捕捉低豐度信號(hào),細(xì)微變化清晰呈現(xiàn);經(jīng)大量抗體驗(yàn)證,結(jié)果可靠、重復(fù)性好。
高效:覆蓋488-850nm光譜,與主流熒光顯微鏡、暗場(chǎng)掃描系統(tǒng)高度適配,通量與信噪比顯著提升。
便捷:TSA熒光染料、DAPI染液(即用型)、TSA buffer、HRP山羊抗兔/鼠通用二抗、抗體稀釋液、3%及抗熒光淬滅封片劑(干固型)一站式配齊,無(wú)需另購(gòu)零散試劑,降低時(shí)間與經(jīng)濟(jì)成本。
產(chǎn)品線覆蓋不同通量需求,規(guī)格均提供20T與100T兩種:

試劑盒4℃條件下可保存12個(gè)月;適用于石蠟切片、冰凍切片、細(xì)胞爬片及細(xì)胞涂片等樣本。需注意:冰凍切片、細(xì)胞爬片及細(xì)胞涂片需單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)mIHC專用抗體洗脫液(貨號(hào):C2208)。
經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的常用多色Panel
多個(gè)常用多色Panel已經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,可以直接復(fù)用,幫你跳過(guò)最折磨人的"調(diào)體系"階段。





不想自己動(dòng)手?TSA技術(shù)服務(wù)同步上線
如果你團(tuán)隊(duì)里沒(méi)有合適的樣本處理?xiàng)l件、多色成像設(shè)備,或者想快速拿到高質(zhì)量數(shù)據(jù),Bioss的TSA(多重免疫熒光)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)(服務(wù)編號(hào):SV1323)已經(jīng)上線,可承接細(xì)胞和組織樣本的檢測(cè),熒光通道覆蓋480nm、520nm、570nm、620nm、690nm、780nm等,支持雙標(biāo)三色到六標(biāo)七色及以上的多色方案。
服務(wù)流程:
1.洽談簽約:提交檢測(cè)請(qǐng)求與實(shí)驗(yàn)要求,與公司商定實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、數(shù)量與費(fèi)用,簽訂《委托TSA檢測(cè)服務(wù)合同書(shū)》;
2.預(yù)實(shí)驗(yàn)確認(rèn):提供檢測(cè)樣品,安排檢測(cè)項(xiàng)目預(yù)實(shí)驗(yàn),雙方根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果商定實(shí)驗(yàn)技術(shù)參數(shù)細(xì)節(jié);
3.正式實(shí)驗(yàn)與交付:實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展正式檢測(cè),在規(guī)定時(shí)間內(nèi)提交實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與檢測(cè)報(bào)告。
配套的樣本前處理與掃描服務(wù)也可以一站完成:石蠟包埋(SV1301)、組織切片(SV1302)、冰凍切片(SV1303),以及全玻片數(shù)字掃描熒光(數(shù)字病理,SV1305)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與材料快遞免費(fèi)寄回,大體積數(shù)據(jù)支持U盤(pán)或硬盤(pán)交付。